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酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)常見問題解析

ELISA是免疫學(xué)反應(yīng)應(yīng)用到科研生產(chǎn)中較為廣泛靈敏的技術(shù)手段。但在新老手操作過程中總是會出現(xiàn)或大或小的問題,尤其是新手在操作過程中遇到的問題會更多。西美杰代理的SeraCare(KPL)品牌做為世界知名免疫學(xué)產(chǎn)品供應(yīng)商擁有近40年的產(chǎn)品研發(fā)經(jīng)驗(yàn),對ELISA實(shí)驗(yàn)有深入的了解,今天就為廣大客戶分享和總結(jié)ELISA中常見問題和解決辦法。

常見問題

可能原因

解決辦法

顯色淡、靈敏度偏低

洗滌時(shí)沖擊力太大、浸泡時(shí)間過長、洗滌次數(shù)增加

按說明書要求保留洗滌時(shí)間,準(zhǔn)確記住洗滌次數(shù)

底物作用時(shí)間不足

準(zhǔn)確定時(shí)

背景深,全部呈有色

洗滌不充分、洗后未拍干,樣品中其它成分殘留或酶標(biāo)記物殘留

濃縮洗滌準(zhǔn)確配制;10倍濃縮洗滌液如有結(jié)晶則應(yīng)讓結(jié)晶于室溫全部溶解后再量取稀釋;充分洗滌,徹底拍干。加樣或加酶標(biāo)板的濾紙應(yīng)棄去不用,不要反復(fù)使用,否則易造成污染

樣品污染

樣品應(yīng)新鮮采集,或低溫保存,防止污染

蒸餾水被污染

使用新鮮蒸餾水

一次實(shí)驗(yàn)的樣本量過多,加樣時(shí)間太長,導(dǎo)致實(shí)際反映時(shí)間延長

合理安排實(shí)驗(yàn),避免幾塊酶標(biāo)板同時(shí)加樣

出現(xiàn)白板,陽性對照不顯色

顯色液變質(zhì)

更換新的顯色液

洗滌液配制有誤

按說明書所示稀釋倍數(shù)配制

 

西美杰代理的SeraCare(KPL)品牌將ELISA底物進(jìn)行優(yōu)化,所提供的ELISA專用顯色系統(tǒng)相對于傳統(tǒng)或者普通顯色底物而言,更具高靈敏度、質(zhì)量穩(wěn)定、批間差小、無致癌性危險(xiǎn),深受廣大科研工作者及診斷試劑生產(chǎn)商的青睞。




 

品名

貨號

規(guī)格

靈敏度

終止前顏色

終止后顏色

ELISA_HRP TMB 1組分底物試劑盒

5120-0075

100 mL

10-15

藍(lán)色

黃色

5120-0076

4 Bottles x 100 mL

5120-0077

1 L

5120-0078

5 L

ELISA_HRP TMB 2組分底物試劑盒

5120-0047

6 Vials x 100 mL(A液+B液)

5*10-15

藍(lán)色

黃色

5120-0050

6 Bottles x 450 mL(A液+B液)

5120-0053

2 Bottles x 100 mL(A液+B液)

ELISA_HRP 高靈敏 TMB 1組分底物試劑盒

5120-0081

100 mL

5*10-16

藍(lán)色

黃色

5120-0082

4 Bottles x 100 mL

5120-0083

1 L

ELISA_HRP ABTS 1組分底物試劑盒

5120-0041

6 Vials x 100 mL

10-13

藍(lán)綠色

藍(lán)綠色

5120-0043

1 L

5120-0046

100 mL

ELISA_HRP ABTS 2組分底物試劑盒

5120-0032

6 Vials x 100 mL(A液+B液)

10-13

藍(lán)綠色

藍(lán)綠色

5120-0033

6 Vials x 450 mLA+B液)


      除上述底物外,西美杰代理的SeraCare(KPL)品牌
是專業(yè)親和純化二抗生成商,能為廣大診斷企業(yè)、科研用戶提供600多種二抗,覆蓋20多個(gè)物種,18種標(biāo)記,具有高純度、特異性強(qiáng)、批間穩(wěn)定等特點(diǎn),產(chǎn)品經(jīng)過ISO90001質(zhì)量體系認(rèn)證。


 

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